El ribosido de nicotinamida, una forma de vitamina B3, protege contra la degeneración axonal inducida por excitotoxicidad-8

El NAD + extracelular implica un mecanismo potencialmente único para prevenir la AxD inducida por excitotoxicidad

NAD + extracelular tiene un efecto protector de axón más bajo que NR en nuestro modelo. Como se informó anteriormente en líneas celulares y células neuronales derivadas de PNS, NAD + se puede convertir extracelularmente a NMN por ENPPase y luego a NR por 59-ENTase (Fig. 5A). Preguntamos si la conversión extracelular de NAD + a NR es necesaria para la protección axonal mediada por NAD + o si este efecto es independiente de la acción de NR. Para este propósito, investigamos la actividad de 59-ENTasa en neuronas corticales, usando una alta concentración de CMP, un inhibidor competitivo de esta enzima (29). Primero, tratamos las neuronas corticales con NMDA 100 mM, con o sin NMN 5 mM durante 24 h. El NMN extracelular redujo significativamente la AxD inducida por NMDA y la CMP 25 mM revirtió el efecto protector de NMM (Fig. 5B). De acuerdo con los datos en otros tejidos (28, 30), estos datos indican que el NMN debe convertirse en NR para mediar la protección axonal.

El efecto beneficioso de NMN también se previno cuando las neuronas corticales se cotrataban con NMDA y el inhibidor de ENT1 / 2 DP, confirmando que el NMN se convierte en el nucleósido NR antes del transporte de la membrana plasmática para prevenir la AxD inducida por NMDA. De acuerdo con una dependencia de la conversión a NR, NR fue más protector a una concentración más baja que NMN. Sorprendentemente, el 5 mM de NAD + fue leve pero significativamente protector, sin embargo, ni CMP ni DP bloquearon la protección axonal conferida por esta alta concentración de NAD + (Fig. 5C).


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Figura 5. NMN requiere la conversión a NR y transportadores de nucleósidos para prevenir AxD inducida por NMDA. A) Representación esquemática del metabolismo extracelular de NAD +: NAD + se convierte en NMN a través de ENPPase y luego en NR a través de ENTase. B) Cuantificación de AxD en neuronas corticales tratadas con NMDA 100 mM durante 24 h después de bloquear la vía extracelular por DP, un inhibidor de ENT, o CMP, un inhibidor de ENTasa. NMDA, NMN, DP y CMP se agregaron como se indica (n = 3–7). C) Cuantificación de AxD en neuronas corticales tratadas con NMDA 100 mM durante 24 h después de bloquear la vía extracelular por DP o CMP. NMDA, NAD +, DP y CMP se agregaron como se indica (n = 3–7). * P, 0.05, ** P, 0.01.