Efecto del mononucleótido de nicotinamida sobre los déficits respiratorios mitocondriales cerebrales en un modelo murino relevante para la enfermedad de Alzheimer-2

Métodos

Animales Ratones relevantes para la enfermedad de Alzheimer Ratones transgénicos dobles que expresan una proteína precursora amiloide (APP) quimérica de ratón / humano con la mutación sueca (APPswe) y una presenilina humana mutante 1 (PS1) con el delta E9 (PS1ΔE9) (cepa # 005864) y Se compraron ratones wildtype C57BL / 6 en el Laboratorio Jackson, (Bar Harbor, ME). AD animales positivos para los transgenes fueron identificados por reacción en cadena de la polimerasa (PCR) utilizando ADN genómico, aislado de las colas (Qiagen, Valencia, CA) y luego procesados como se describe anteriormente [14].

Ratones CaMKIIα-tTA y pTRE-mito / eYFP Ratones transgénicos que expresan la proteína transactivadora controlada por tetraciclina (tTA) bajo control regulador del promotor de la quinasa II dependiente de calcio / calmodulina (CaMKII) [20] y animales que expresan pTRE-mito / eYFP [ 21] fueron comprados en el Laboratorio Jackson.

Se generaron ratones bigénicos positivos para CaMKIIα-tTA y pTRE-mito / eYFP (CaMK2a-mito / eYFP) cruzando estas dos cepas. Se usaron ratones biógenos machos y hembras (2 meses) en este estudio. CaMK2amito / eYFP ratones biógenos fueron identificados por PCR como se describe anteriormente [21]. El Comité Institucional de Uso y Cuidado de Animales de la Facultad de Medicina de la Universidad de Maryland aprobó todos los procedimientos relacionados con el cuidado de animales, la eutanasia y la recolección de tejidos.

La administración de mononucleótido de nicotinamida (NMN) APP (swe) / PS1 (ΔE9) y ratones machos y hembras CaMK2a-mito / eYFP (2 meses) fueron administrados NMN (100 mg / kg, Sigma N3501) en PBS estéril (200 μl) por vía subcutánea ( en la piel suelta alrededor del área del cuello y los hombros) cada dos días durante 28 días. No transgénico   (NTG) y los animales de control del vehículo se administraron 200 μl de PBS estéril por vía subcutánea cada dos días durante 28 días. La administración subcutánea se utilizó en base a estudios piloto. No se observaron diferencias significativas en peso o características externas (condición de la piel, energía, tamaño, etc.) entre NMN y ratones tratados con vehículo (datos no mostrados).